克唑替尼耐药机制是什么?

       尽管肺癌药赛可瑞(克唑替尼)的疗效显着，但具有初始反应的患者不可避免地会在一到两年内对克唑替尼产生抗药性。耐药机制包括ALK的获得性突变，例如ALKL1196M和G1269A点突变，这些突变阻碍了克唑替尼的结合。ALK下游信号通路中的激活突变，例如KRAS和PIK3CA的激活;ALK融合蛋白的过表达;和激活ALK绕过EGFR，MET和HGF等信号通路。在其余患者中，尚无已知的继发性抵抗的机制。

　　为了探索对克唑替尼耐药的机制，我们在对270名ALK断裂的荧光原位杂交(FISH)阳性NSCLC患者进行初步筛选后，对42例患者进行了回顾性研究。进行了下一代测序(NGS)，并对治疗前和治疗后样品的突变谱进行了分析，为ALK-TKI治疗后的治疗策略提供了可能的指导。

　　全部270位患者口服了250 mg赛可瑞两次，有182位患者经历了疾病进展。在这182例患者中，有42例可用于NGS测试的样本(FFPE切片或血浆)患者被纳入研究。在该患者队列中，一半的患者(n = 21，50%)达到了克唑替尼≤3个月的PFS，而21位患者(50%)的克唑替尼> 3个月达到了PFS。值得注意的是，根据NGS的结果，在克唑替尼的PFS <3个月的6例患者中(14%)未检测到ALK重排。

　　根据ALK阳性患者的遗传特征，TP53是最常见的突变基因，其次是ALK重排。ALK重排患者中复发≥2的其他突变基因包括SETD2，RB1，CREBBP和ATM。根据Fisher精确检验，在PFS≤3个月和> 3个月的患者之间，这些基因的突变频率没有差异。

　　值得注意的是，在患者1中检测到先前存在的ALKE1303K突变，他们在克唑替尼治疗和7天的PFS后经历了疾病进展。为了研究此突变是否与不良的临床结果相关联，我们使用PyMOL基于ALK激酶结构域的晶体结构重建了ALKE1303K突变的3D结构。点突变位于克唑替尼结合口袋的某个距离处，对蛋白质结构的影响未知。