卵泡蛋白缺陷的肾癌细胞表现出 BRCA1 A 复合表达损伤和对 PARP1 抑制剂奥拉帕尼的敏感性

　　卵泡蛋白 (FLCN) 缺乏可能导致 Birt-Hogg-Dubé (BHD) 病患者发生肾细胞癌 (RCC)。在这项研究中，我们研究了 PARP 抑制剂奥拉帕尼在 FLCN 缺陷型 RCC 细胞中诱导的细胞毒性，以及 FLCN 与 BRCA1 A 复合物调节的 DNA 修复途径之间的相互作用。

　　本研究使用了FLCN 表达(ACHN 和 UOK257-F)和 FLCN 缺陷(ACHN-2 和 UOK257)细胞系。通过克隆形成试验和MTT试验检测细胞活力。流式细胞术和TUNEL法用于检测细胞凋亡。通过 MDC 测定、蛋白质印迹和透射电子显微镜测量细胞中的自噬。进行免疫共沉淀、免疫荧光和蛋白质印迹实验以确定 FLCN 蛋白和 BRCA1 A 复合物之间的相互作用。通过在裸鼠中接种 UOK 257 在异种移植模型中进行体内实验。

　　FLCN蛋白缺乏的RCC细胞比FLCN表达的细胞对奥拉帕尼处理更敏感。与表达 FLCN 的 ACHN 和 UOK257-F 细胞相比，奥拉帕尼治疗导致 FLCN 缺陷的 ACHN-2 和 UOK257 细胞发生更严重的自噬和凋亡。在 FLCN 缺陷细胞中检测到 BRCA1 A 复合物表达降低和 DNA 修复能力破坏，表明 FLCN 缺陷损害了 BRCA1 A 复合物表达并使细胞对 PARP 抑制剂奥拉帕尼敏感。

　　由于 BRCA1 A 复合物相关的 DNA 修复能力受损，FLCN 缺陷的 RCC 细胞对奥拉帕尼治疗敏感。结果表明，PARP 抑制剂，如奥拉帕尼，可能是治疗 FLCN 蛋白缺乏的肾肿瘤的一种潜在有效的治疗方法。